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賽默飛離子色譜柱選擇、清洗、存放的幾個要點

更新時間:2019-08-05      點擊次數(shù):4570
   賽默飛離子色譜柱是一種通過檢測液體中陰陽離子的常量以及痕量的測量方式,在該過程中,利用抑制住抑制水質(zhì)中電解質(zhì)的背景導(dǎo)電率的目的,是液相色譜。賽默飛離子色譜的特點主要在于利用了樹脂材料,而其進(jìn)樣體積較小,對于淋出液能夠進(jìn)行在線自動連接的電導(dǎo)檢測。一般采用酸、堿及鹽的水溶液作為流動相,要求系統(tǒng)可以耐酸、耐堿,因此通常賽默飛離子色譜裝置采用非金屬材質(zhì)。
  一、賽默飛離子色譜柱的選擇
  1、樣品是極性的且弱酸性的就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測,即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱
  2、如果樣品極性太強,或酸性太強;可以選擇CN,NH2,或硅膠柱,HILIC(親水色譜),也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。缺點是離子對試劑平衡時間長,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗,另外離子對試劑很難洗下來,基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗。
  3、若樣品是堿性的可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì),且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等),他們都會減少堿性化合物的拖尾,一般會選擇中性或偏堿的條件下做,因為這樣可增加堿性樣品的保留。
  4、如果堿性化合物的極性太強,或堿性太強;可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測,優(yōu)點是方法開發(fā)簡單,缺點是目前實現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少,價格也高?;蛘哌x用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用,這也是很經(jīng)典的檢測堿性樣品的方法)選擇強離子交換柱。缺點是不能用來分析其它樣品,對流動相pH要求比較精密,否則很難重復(fù)實驗。也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。
  二、賽默飛離子色譜柱的清洗
  1.對所做的樣品要有充分的了解
  用對該樣品洗脫能力zui強的流動相清洗
  2、硅膠柱的一般方法
  先用甲醇法洗去極性雜質(zhì)
  用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
  3、鍵合相柱(烷基)的一般方法
  20倍柱體積德:甲醇-氯仿-甲醇-水依次沖洗
  柱子尺寸柱子體積沖洗體積
  150*4.6mm2.5ml50ml
  200*4.6mm3.3ml65ml
  250*4.6mm4.2ml80ml
  三、賽默飛離子色譜柱的存放
  1、存放前的處理(除去雜質(zhì)、鹽)
  2、合適的存放溶劑
  3、避免色譜柱床的干枯
  4、避免機械震動
  5、防止細(xì)菌生長
  6、注意存放的溫度

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